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循環(huán)腫瘤細(xì)胞捕獲方法的研究進(jìn)展
來源: | 作者:admin | 發(fā)布時間: 2019-06-19 | 1736 次瀏覽 | 分享到:
循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTCs)是從原發(fā)腫瘤組織脫落 并侵襲進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)中的腫瘤細(xì)胞。CTCs能夠通過血液循環(huán)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移至其他組織上并發(fā)展為轉(zhuǎn)移灶,這是導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移的主要途徑之一

循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTCs)是從原發(fā)腫瘤組織脫落 并侵襲進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)中的腫瘤細(xì)胞。CTCs能夠通過血液循環(huán)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移至其他組織上并發(fā)展為轉(zhuǎn)移灶,這是導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移的主要途徑之一。研究表明,血液中CTCs的數(shù)量與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn) 移密切相關(guān),因此在臨床中可用于腫瘤的早期診斷, 以及監(jiān)測患者的療效和復(fù)發(fā)情況。同時,由于 CTCs 攜帶原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶信息,因此深入分析CTCs中的蛋白質(zhì)、核酸等信息可以指導(dǎo)腫瘤患者 用藥,檢測抗藥性,以及調(diào)整治療方案等。因此, 實(shí)現(xiàn)對血液中CTCs的捕獲與檢測具有十分重要的 生物學(xué)和臨床意義。然而, CTCs 不僅在血液中含 量極少,而且受血細(xì)胞等干擾極其嚴(yán)重,因此實(shí)現(xiàn)對 CTCs的高選擇性捕獲極具挑戰(zhàn)。

為了有效捕獲血液中的 CTCs,現(xiàn)有方法從原 理上可以分為3類:基于CTCs和血細(xì)胞尺寸、密度 等差異的生物物理方法;依靠抗體與CTCs細(xì)胞表 面抗原特異性親和的生物親和方法;模擬抗體-抗原 原理的人工抗體方法。本文對上述方法進(jìn)行了綜 述,并從捕獲效率、捕獲純度和釋放活性保持等方面 進(jìn)行了討論。此外,還對 CTCs捕獲方法的發(fā)展趨勢進(jìn)行了展望。

1. 基于生物物理原理的CTCs捕獲方法   

基于生物物理原理的捕獲方法是指利用CTCs 與其他細(xì)胞在大小、密度、質(zhì)量、電極性和聲感性等 的差異,采用過濾、離心、電泳、慣性聚焦、聲波等方 式實(shí)現(xiàn)分離。由于該方法不依賴于細(xì)胞表面的特異 性抗原,被稱為“無標(biāo)記”方法

2. 基于生物親和原理的CTCs捕獲方法 

CTCs 具有腫瘤細(xì)胞的特征和組織來源標(biāo)志 物,如上皮細(xì)胞黏附分子( EpCAM)、細(xì)胞角蛋白質(zhì) CK)、癌胚抗原( CEA)和前列腺抗原( PSA)等。 基于生物親和原理的CTCs捕獲方法是將上述標(biāo)志 物的抗體固載于基質(zhì)材料表面,基于抗體與標(biāo)志物 之間的特異性結(jié)合,實(shí)現(xiàn) CTCs的分離與捕獲。由 于基質(zhì)材料的表面為抗體與細(xì)胞的結(jié)合提供微環(huán) 境,因此對CTCs的捕獲具有一定影響。目前,基于 生物親和原理的基質(zhì)材料主要包括磁珠、微流控芯 片和具有微納米結(jié)構(gòu)的材料等。

3. 基于人工抗體的CTCs捕獲方法

 人工抗體是通過模擬抗體-抗原相互作用機(jī)理, 以分子識別為基礎(chǔ)、能夠與靶標(biāo)分子特異性結(jié)合的 人工合成材料,包括適配體、特異性多肽和分子印跡 材料,其既具有與抗體相當(dāng)?shù)慕Y(jié)合常數(shù),又具有 成本低、穩(wěn)定性好、易化學(xué)合成和修飾等優(yōu)勢,已在 小分子藥物、環(huán)境污染物、多肽和蛋白質(zhì)識別與分離 中得到廣泛應(yīng)用。雖然人工抗體在CTCs捕獲方面 尚處于起步階段,但是已經(jīng)顯示出良好的應(yīng)用前景。

綜上所述,近幾十年來,研究人員開發(fā)了多種 CTCs捕獲方法(見表 1),并成功實(shí)現(xiàn)了血液中 CTCs的捕獲和鑒定,發(fā)現(xiàn)CTCs的數(shù)量與腫瘤的發(fā) 生、發(fā)展與預(yù)后密切相關(guān)。



為腫瘤診療的有效途徑之一,研究人員不斷
 深入研究CTCs的分子特征、生物功能以及臨床應(yīng) 用等,進(jìn)而對 CTCs 捕獲方法提出了更高的要求。 因此,未來的CTCs捕獲方法需同時滿足更高的捕 獲效率、選擇性和回收率,從而保證后續(xù)分析具有充 足的樣本;需保證被捕獲細(xì)胞能夠無損釋放,從而用 于后續(xù)細(xì)胞活性和藥敏性評價;需具有通用性,從而 降低臨床應(yīng)用的假陽性和假陰性結(jié)果。隨著現(xiàn)代分 離分析技術(shù)的發(fā)展和對 CTCs 認(rèn)識的不斷深入, CTCs分離和捕獲的特異性將不斷提高,特別是捕 獲、釋放和檢測分析一體化方法的建立,將有助于推 動CTCs從基礎(chǔ)研究到臨床應(yīng)用的進(jìn)一步轉(zhuǎn)化
。