CTCs計(jì)數(shù)高的患者預(yù)后差,化療后CTCs計(jì)數(shù)下降多的患者,化療效果較好,死亡風(fēng)險(xiǎn)降低,提示CTCs對(duì)廣泛期的小細(xì)胞肺癌具有預(yù)測(cè)作用,并且化療后CTCs計(jì)數(shù)的改變可以提供有價(jià)值的臨床信息,指導(dǎo)后續(xù)治療。
早期胃癌往往臨床癥狀不明顯,當(dāng)出現(xiàn)明顯癥狀時(shí),已到中晚期,失去了治療的最佳時(shí)機(jī)。因此早期診斷、治療胃癌是提高患者生存率的關(guān)鍵。CTCs對(duì)胃癌特別是早期胃癌的發(fā)現(xiàn)及診斷目前尚處于探索和研究階段。李熳等對(duì)45例胃癌患者CTCs進(jìn)行了檢測(cè),其中27例(60%)檢出有CTCs,CTCs陽(yáng)性與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)密切相關(guān),而與性別、年齡、腫瘤部位和TNM分期、腫瘤分化程度無(wú)關(guān)[27]。曹中正等于2014年報(bào)道了運(yùn)用免疫磁珠法陰性富集CTCs并行免疫熒光原位雜交檢測(cè)技術(shù)[28]。41例胃癌患者中CTCs陽(yáng)性率為63.4%,24例良性胃?。ㄎ笣兓蚵晕秆祝┗颊?/span>CTCs陽(yáng)性率為8.3%。且發(fā)現(xiàn)胃癌患者外周血中CTCs水平升高與TNM分期無(wú)關(guān),胃癌早期階段外周血中便可檢出CTCs,提示可能在腫瘤早期階段即發(fā)生微轉(zhuǎn)移。Hiraiwa等利用CellSearch System發(fā)現(xiàn)外周血中CTCs≥2組總生存率顯著低于CTCs<2組;Matsusaka等人則發(fā)現(xiàn)CTCs≥4組的化療病人總生存期和無(wú)進(jìn)展生存期要顯著小于CTCs<4組,提示CTCs水平也許與化療藥物治療反應(yīng)相關(guān)。
4 主要循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)儀器簡(jiǎn)介
美國(guó)FDA在2004年、2007年和2008年分別批準(zhǔn)了美國(guó)強(qiáng)生公司子公司Veridex開(kāi)發(fā)的Cellsearch CTCs檢測(cè)技術(shù)用于轉(zhuǎn)移性乳腺癌、結(jié)直腸癌與前列腺癌的預(yù)后評(píng)估、無(wú)進(jìn)展生存期和總生存期的預(yù)測(cè)。Cellsearch也是目前唯一被FDA批準(zhǔn)用于臨床的檢測(cè)系統(tǒng)。2007年美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)(American Society of Clinical Oncology,ASCO)將CTCs納入了腫瘤標(biāo)志物范疇;2012年國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局(China Food and Drug Administration,CFDA)批準(zhǔn)Veridex的CellSearch系統(tǒng)用于檢測(cè)CTCs以評(píng)估轉(zhuǎn)移性乳腺癌的預(yù)后;2013年CTCs檢測(cè)被納入美國(guó)醫(yī)保;2016年初CFDA批準(zhǔn)了格諾思博生物科技有限公司自主研發(fā)的首個(gè)肺癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)-葉酸受體陽(yáng)性CTC檢測(cè)試劑盒(注冊(cè)證編號(hào):國(guó)械注準(zhǔn)20163400061)。該試劑盒采用了國(guó)內(nèi)原創(chuàng)的靶向PCR CTC檢測(cè)技術(shù),顯著提高了CTC檢測(cè)的敏感性。
自2004年,Cellsearch檢測(cè)系統(tǒng)獲得美國(guó)FDA的認(rèn)證后,10多年間CTCs檢測(cè)技術(shù)及檢測(cè)儀器突飛猛進(jìn),涌現(xiàn)了許多專(zhuān)注于CTCs診斷的公司,生產(chǎn)的檢測(cè)儀器品牌有四十幾種之多[29],包括強(qiáng)生Veridex公司、凱杰公司(Qiagen)、Epic Sciences、CytoTrack、Codiak BioSciences、Illumina、Thermo Fisher以及Celsee Diagnostics等等。以下簡(jiǎn)介幾種作者認(rèn)為較有代表性的CTCs檢測(cè)儀器:
4.1 Cellsearch CTCs檢測(cè)系統(tǒng)
Cellsearch CTCs檢測(cè)系統(tǒng)是Veridex公司(Veridex公司是強(qiáng)生的一個(gè)子公司)專(zhuān)有的一項(xiàng)技術(shù),是一種高效的、半自動(dòng)化的CTCs檢測(cè)系統(tǒng)。該系統(tǒng)采用一種獨(dú)創(chuàng)的稱為鐵磁流體的抗體,這種鐵磁流體可同鐵微粒相結(jié)合,且與CTCs表面的EpCAM+/CK+/CD45+等受體有極強(qiáng)的特異性結(jié)合的能力,系統(tǒng)用磁場(chǎng)將CTCs分離之后進(jìn)行生物或化學(xué)染色,細(xì)胞表面具有EpCAM+/CK+/CD45+被識(shí)別為腫瘤細(xì)胞。該系統(tǒng)包括三部分:⑴細(xì)胞收集保存管:采集并完善保存細(xì)胞使樣本可在室溫下保存小時(shí),方便批量處理和遠(yuǎn)途運(yùn)輸;⑵樣本準(zhǔn)CellTracks? AutoPrep?系統(tǒng):采用自動(dòng)化可復(fù)驗(yàn)的樣本準(zhǔn)備,可自動(dòng)化樣本快速分析,以得到更精確的結(jié)果;⑶樣本分析CellTracksAnalyzer II?系統(tǒng):可自動(dòng)化樣本快速分析。Cellsearch CTCs檢測(cè)系統(tǒng)既可以用于體外診斷也可供研究使用,同時(shí)將微量細(xì)胞進(jìn)行分析的過(guò)程半自動(dòng)化、標(biāo)準(zhǔn)化,使其成為一個(gè)簡(jiǎn)單的三步流程。
4.2 Celsee PREP
Celsee PREP是美國(guó)Celsee Diagnostics公司生產(chǎn)的全自動(dòng)循環(huán)腫瘤細(xì)胞富集和檢測(cè)平臺(tái)。其產(chǎn)品包括CTC富集和檢測(cè)系列CelseePREP100 、Celsee PREP400以及圖像分析儀Celsee ANALYZER。與其它免疫學(xué)與免疫磁珠、離心等富集分析方法不同,其而不依賴于特定的標(biāo)志物,而是通過(guò)腫瘤細(xì)胞的物理特性來(lái)捕獲富集。在現(xiàn)有使用過(guò)濾方法富集